【佳學(xué)基因檢測(cè)】宮頸癌基因檢測(cè)：查基因突變、查HPV感染
為什么要做宮頸癌基因檢測(cè)和篩查？
《宮頸癌的基因篩查和診斷》，宮頸癌篩查有兩種類(lèi)型的診斷測(cè)試：帕帕尼科勞測(cè)試和HPV測(cè)試。第一種是早期發(fā)現(xiàn)癌前病變和癌細(xì)胞病變，以便有效治療，第二種是HPV感染，可能導(dǎo)致癌癥。大多數(shù)HPV感染是可以自我治好的，不會(huì)引起癌前細(xì)胞變化；只有特定HPV類(lèi)型的慢性感染才能導(dǎo)致宮頸細(xì)胞異常。如果這些異常（癌前病變或高級(jí)別病變）得不到治療，多年后可能會(huì)演變成宮頸癌。
宮頸癌基因檢測(cè)項(xiàng)目介紹
HPV DNA或RNA的分子檢測(cè)是目前鑒定HPV的金標(biāo)準(zhǔn)。有三類(lèi)分子分析可用于檢測(cè)組織和脫落細(xì)胞樣本中的HPV感染，它們都基于HPV DNA的檢測(cè)，包括非擴(kuò)增雜交分析、southern轉(zhuǎn)移雜交（STH）、斑點(diǎn)雜交（DB）和原位雜交（ISH); 信號(hào)擴(kuò)增雜交分析，如雜交捕獲分析，靶向擴(kuò)增分析，如聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）和原位PCR?；贖PV檢測(cè)的PCR具有極高的敏感性和特異性。此外，可以通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄酶（RT）PCR或基于核酸序列的擴(kuò)增（NASBA）檢測(cè)宮頸標(biāo)本中的HPV E6/E7 mRNA和致癌活性。在NASBA分析中，單鏈核酸或RNA等價(jià)物（如病毒基因組RNA、mRNA或rRNA）在雙鏈DNA背景下擴(kuò)增。如今，三種基于DNA和一種基于RNA的檢測(cè)方法已被美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)用于常規(guī)宮頸癌篩查。其中包括Digene Hybrid Capture 2高風(fēng)險(xiǎn)HPV DNA檢測(cè)、Cervista HPV HR檢測(cè)、Cobas®HPV檢測(cè)和基于RNA的Aptima®HPV檢測(cè)。HC2試驗(yàn)用于同時(shí)檢測(cè)至少13種致癌HPV類(lèi)型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68），是一種核酸雜交試驗(yàn)，使用微孔板化學(xué)發(fā)光進(jìn)行信號(hào)放大，用于半定量檢測(cè)宮頸標(biāo)本中的HPV DNA。除了13種致癌的HPV類(lèi)型通過(guò)HC2檢測(cè)，Cervista HPV HR檢測(cè)法也可以檢測(cè)可能存在的HR HPV 66型。Cobas 4800HPV PCR組合使用的引物可擴(kuò)增HPV基因組L1多態(tài)性區(qū)域內(nèi)約200個(gè)堿基對(duì)的區(qū)域。12種HR型HPV（31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和68）的熒光信號(hào)可使用相同的熒光標(biāo)簽檢測(cè)，而HPV 16、18和β-珠蛋白信號(hào)分別使用三種光譜獨(dú)特的熒光標(biāo)簽檢測(cè)。每個(gè)標(biāo)簽具有不同的單獨(dú)波長(zhǎng)特征，允許同時(shí)對(duì)HPV 16和18擴(kuò)增子進(jìn)行基因分型，與其他HR類(lèi)型不同。
宮頸癌基因檢測(cè)的頻率
根據(jù)癌癥協(xié)會(huì)的最新指南，宮頸癌的篩查應(yīng)該在21歲開(kāi)始。年輕女性不應(yīng)進(jìn)行巴氏試驗(yàn)或HPV試驗(yàn)篩查。21-29歲的女性應(yīng)每3年進(jìn)行一次巴氏試驗(yàn)篩查。在21-29歲之間，連續(xù)兩次或兩次以上細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果呈陰性的女性中，數(shù)據(jù)不足以斷言篩查間隔時(shí)間應(yīng)當(dāng)延長(zhǎng)（>3年）。只有在巴氏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)異常后，才應(yīng)在這些年齡段使用HPV檢測(cè)。30-65歲的女性應(yīng)每5年進(jìn)行一次巴氏試驗(yàn)和HPV檢測(cè)（聯(lián)合檢測(cè)）。這種篩查更可取，但每3年繼續(xù)進(jìn)行巴氏試驗(yàn)篩查也是可以接受的。數(shù)據(jù)不足以支持該年齡組在多次陰性測(cè)試后測(cè)試間隔時(shí)間可以延長(zhǎng)更長(zhǎng)。
如何接種宮頸癌疫苗？
至于疫苗接種，有三種疫苗（Gardasil、Gardasil 9和Cervarix）可用于預(yù)防感染多種已知可導(dǎo)致宮頸癌的HPV。Gardasil 9有助于預(yù)防9種HPV類(lèi)型（6、11、16、18、31、33、45、52和58）的感染，Gardasil有助于預(yù)防4種HPV類(lèi)型（6、11、16和18）的感染，Cervarix有助于預(yù)防16和18型HPV的感染。Gardasil和Gardasil 9分3次（0、2和6個(gè)月）注射，最近，15歲以下的年輕女孩在0個(gè)月和6個(gè)月時(shí)只接受2次注射。Cervarix也通過(guò)注射給藥，需要3劑（0、1和6個(gè)月）。這些市售疫苗由L1衣殼蛋白組成，組裝成病毒樣顆粒（VLP），誘導(dǎo)中和抗體，阻止病毒進(jìn)入宮頸上皮細(xì)胞。雖然在年輕女性中完成的大型III期試驗(yàn)證明了90%以上的有效性，但疫苗研發(fā)人員現(xiàn)在正在解決更廣泛的問(wèn)題，如對(duì)男孩的有效性、保護(hù)的壽命以及誘發(fā)致癌非疫苗HPV菌株的交叉反應(yīng)抗體。在美國(guó)，建議所有9歲至26歲的女孩和婦女接種任何疫苗的HPV疫苗。建議9歲至21歲的男孩和男子接種HPV疫苗，最多可在26歲時(shí)放棄。不應(yīng)該每年都進(jìn)行巴氏試驗(yàn)，因?yàn)橛袝r(shí)提到癌前病變時(shí)并沒(méi)有真正存在。這些假陽(yáng)性結(jié)果可能導(dǎo)致不需要的治療。最新的大規(guī)模人群篩查指南保留了診斷測(cè)試的益處，但降低了不必要治療的風(fēng)險(xiǎn)。因良性疾病接受全子宮切除術(shù)（包括宮頸）且無(wú)宮頸癌或嚴(yán)重癌前病變史的婦女不應(yīng)接受篩查。最后但并非最不重要的一點(diǎn)是，已接種HPV病毒疫苗的婦女應(yīng)根據(jù)其年齡組的指南繼續(xù)進(jìn)行篩查。
The HPV test should be used in these ages only after Pap test abnormal findings. Women between 30-65 years should be screened with both Pap test and HPV test (co-testing) every 5 years. This type of screening is preferable, but the continuing of Pap test screening every 3 years is also acceptable. Data is inadequate to support longer interval time between tests in this age group after a number of negative tests [15]. As for vaccination, three vaccines (Gardasil, Gardasil 9 and Cervarix) are available to prevent infection with multiple types of HPV known to cause cervical cancer. Gardasil 9 contributes to preventing infection with 9 HPV types (6, 11, 16, 18, 31, 33, 45, 52 and 58), Gardasil helps preventing infection with 4 HPV types (6, 11, 16 and 18) and Cervarix helps preventing infection with HPV types 16 and 18. Gardasil and Gardasil 9 are given by injection in 3 doses (0,2 and 6 months) and recently it was approved to be given with only 2 injections at 0 and 6 months in young girls less that 15 years old. Cervarix is also administered by injection and requires 3 doses (0,1 and 6 months) [16]. These commercially available vaccines consisting of the L1 capsid protein assembled as virus like particles (VLPs) induce neutralizing antibodies that deny access of the virus to cervical epithelial cells. While greater than 90% efficacy has been demonstrated at the completion of large phase III trials in young women, vaccines developers are now addressing broader issues such as efficacy in boys, longevity of the protection and inducing cross reactive antibody for oncogenic non-vaccine HPV strains. In the United States, HPV vaccination with any vaccine is recommended for all girls and women who are between ages 9 and 26 years old. HPV vaccination is recommended for boys and men who are between ages 9 and 21 years and can be given up to 26 years of age [16]. Pap test should not be offered every year because sometimes precancerous lesions are mentioned without really existing. These false positive results may lead to treatments that are not needed. The latest guidelines for mass population screening maintain the benefits of diagnostic tests but they reduce the risk of unnecessary treatment [17,18]. Women who have undergone total hysterectomy (including cervix) for benign diseases and do not have cervical cancer or severe precancerous lesions history, should not be screened. Last but not least, women who have been vaccinated against the HPV virus should continue the screening according to the guidelines for their age group.
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